期刊简介
1950年创刊，中华医学会主办。本刊读者为全国眼科工作者，以纸载体、光盘版及信息网络传播等方式国内外公开出版和发行，并与美国、日本等30多个国家和地区定期交换杂志。多年来本刊的影响因子、总被引频次等各项指标在国内本专业期刊中均名列前茅，是国内眼科的名牌期刊。所载论文目前已被美国《医学索引（IM/MEDLINE）》等国内外11种以上重要数据库收录；国内重要信息研究机构、图书馆及医药院校和科研单位等，均将本刊列为核心期刊。本刊曾先后荣获国家科委、中国科协等重要奖项，连续6年获得“中国科协精品科技期刊工程示范项目”称号。
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首页>中华眼科杂志
- 杂志名称：中华眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0412-4081
- 国内刊号：11-2142/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年荣获国家科委全国优秀科技期刊评比三等奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
永生化人晶状体上皮细胞细胞周期调控相关基因表达的检测
吴明星；李绍珍；曾骏文；高劲松；刘奕志
关键词：晶体, 上皮细胞, 细胞培养, 细胞周期蛋白E, 细胞周期蛋白质依赖激酶类
摘要：目的探讨人类晶状体上皮细胞(human lens epithelial cells, HLEC)周期调控中的细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白激酶(cyclin dependent kinase 2, CDK2)和细胞周期蛋白激酶抑制因子(cyclin-dependent-kinase inhibitor, CKI)p21基因的表达,阐明HLEC增殖和晶状体后囊膜混浊(posterior capsule opacification, PCO)的分子机制.方法体外培养永生化HLEC系HLE-B3,用二步过量胸苷阻断法进行细胞周期同步化;流式细胞仪检测细胞周期;收集不同时相的细胞提取总RNA.用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)方法检测细胞周期蛋白E、CDK2和p21的mRNA表达;分别用免疫组织化学染色和Western blot法检测细胞周期蛋白E和CDK2及p21的蛋白表达.结果流式细胞仪检测:HLE-B3细胞周期处于G1期,占33.5 %;S期,占46.1%;G2期,占20.4%;处于S期及G2期细胞的比例约占总数的66.5%.RT-PCR检测:可见不同周期时相的HLE-B3细胞(细胞周期蛋白E和CDK2)mRNA的表达,但在不同步化的细胞时相中未检测出细胞周期蛋白E的表达.而在同步化的S期细胞中有少许p21 mRNA表达.免疫组织化学染色未检测出细胞周期蛋白E阳性细胞,仅可检测出少部分p21阳性细胞.Western blot法检测结果:CDK2阳性表达以S期细胞明显,G1期和G2期略低于S期表达.不同步化细胞也有CDK2的表达.提示细胞周期蛋白E、CDK2 与p21的mRNA蛋白表达不平衡.结论体外培养HLE-B3细胞周期过程中存在细胞周期蛋白E、CDK2 和p21的表达,且存在表达不平衡.细胞周期蛋白E、CDK和CKI间的表达不平衡有可能是其体外增殖细胞周期分子机制之一.
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