期刊简介
1950年创刊，中华医学会主办。本刊读者为全国眼科工作者，以纸载体、光盘版及信息网络传播等方式国内外公开出版和发行，并与美国、日本等30多个国家和地区定期交换杂志。多年来本刊的影响因子、总被引频次等各项指标在国内本专业期刊中均名列前茅，是国内眼科的名牌期刊。所载论文目前已被美国《医学索引（IM/MEDLINE）》等国内外11种以上重要数据库收录；国内重要信息研究机构、图书馆及医药院校和科研单位等，均将本刊列为核心期刊。本刊曾先后荣获国家科委、中国科协等重要奖项，连续6年获得“中国科协精品科技期刊工程示范项目”称号。
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首页>中华眼科杂志
- 杂志名称：中华眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0412-4081
- 国内刊号：11-2142/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年荣获国家科委全国优秀科技期刊评比三等奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
短发夹RNA对人视网膜色素上皮细胞血管内皮生长因子表达的抑制
蔡春梅；孙葆忱；刘旭阳
关键词：RNA干扰, 血管内皮生长因子A, 色素上皮细胞, 眼
摘要：目的探讨针对人血管内皮生长因子(VEGF)的短发夹RNA(shRNA)在体外对视网膜色素上皮(RPE)细胞VEGF表达的影响. 方法用酶辅助显微分离法分离人RPE细胞,并用细胞角蛋白和S-100进行免疫组化鉴定.设计针对人VEGF的短发夹RNA(shRNAs,P1,P2), P3为阴性对照即不含特异性shRNA,P1、P2退火后双链DNA连接到质粒pSilencer 4.1-CMV的BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切位点.转化细菌后,提取的质粒用EcoRⅠ和 SamⅠ进行酶切鉴定.实验分5组,第1组:RPE细胞中在含有100 μmol/L CoCl2,10%胎牛血清(FBS)的DMEM培养基中培养30 h;第2组:在常规含有10% FBS的DMEM培养基中培养30 h;第3、4、5组:分别P1、P2、P3转染细胞24 h后在含有100 μmol/L CoCl2 的10% FBS的DMEM培养基中培养30 h;用免疫印迹法检测各组细胞VEGF表达水平. 结果培养的细胞用细胞角蛋白和S-100免疫组化染色阳性.提取的质粒经酶切后片断相对分子质量分别为3300 和1600,说明质粒成功地提取和纯化.VEGF表达水平1组明显高于2、3、4组(均P<0.001).乏氧(2组与1组比)可以明显增加RPE细胞中VEGF的表达.3、4组(P1和P2)对VEGF表达抑制分别为65.9% 和 52.4%.5组与1组比差异无统计学意义(P=0.147).各组间β肌动蛋白表达量差异无统计学意义.结论针对人VEGF的特异性shRNA可以明显降低人RPE细胞VEGF的表达,为RNA干扰治疗新生血管性眼病,尤其是脉络膜新生血管奠定了基础.
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