期刊简介
1950年创刊，中华医学会主办。本刊读者为全国眼科工作者，以纸载体、光盘版及信息网络传播等方式国内外公开出版和发行，并与美国、日本等30多个国家和地区定期交换杂志。多年来本刊的影响因子、总被引频次等各项指标在国内本专业期刊中均名列前茅，是国内眼科的名牌期刊。所载论文目前已被美国《医学索引（IM/MEDLINE）》等国内外11种以上重要数据库收录；国内重要信息研究机构、图书馆及医药院校和科研单位等，均将本刊列为核心期刊。本刊曾先后荣获国家科委、中国科协等重要奖项，连续6年获得“中国科协精品科技期刊工程示范项目”称号。
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首页>中华眼科杂志
- 杂志名称：中华眼科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：0412-4081
- 国内刊号：11-2142/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1992年荣获国家科委全国优秀科技期刊评比三等奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 维普收录(中), CA 化学文摘(美), 文摘与引文数据库, 国家图书馆馆藏, 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 知网收录(中), 万方收录(中), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
微小RNA芯片检测高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞微小RNA的差异表达
李青兰；吕红彬；苟文军
关键词：视网膜血管, 内皮细胞, 微RNAs, 寡核苷酸序列分析
摘要：目的 筛选高糖环境下人视网膜微血管内皮细胞( HRCEC)差异表达的微小RNA(miRNA),并预测部分差异表达的miRNA调控的靶基因.方法 实验研究.常规培养HRCEC,取生长良好的第3～4代HRCEC,将细胞分为3组:(1)正常对照组:培养液为DMEM高糖培养液,含25 mmol/L葡萄糖；(2)高糖组:培养液为条件培养液,含90 mmol/L葡萄糖；(3)甘露醇高渗对照组:培养液为条件培养液,含65 mmol/L甘露醇+25 mmol/L葡萄糖.各组细胞在上述条件下培养5d后,用细胞凋亡检测试剂盒对细胞进行凋亡检测；提取细胞的总RNA并进行质量检测；miRNA芯片检测差异表达的miRNA,并用实时荧光定量PCR对部分差异表达的miRNA进行验证,运用生物信息学方法预测它们可能调控的靶基因.结果 在荧光显微镜下观察细胞凋亡结果显示,正常对照组及甘露醇高渗对照组细胞的细胞核被4',6-二脒基-2-苯基吲哚染色而呈蓝色荧光,但无凋亡荧光信号:高糖组细胞的细胞核也呈蓝色荧光,但有绿色的凋亡荧光信号.总RNA的质量检测结果显示,用分光光度计测量正常对照组细胞吸光度值(A)的比值,A260/A280=1.99、A260/A230=2.05；高糖组细胞A260/A280=1.98、A260/A230=2.26.甲醛变性琼脂糖凝胶电泳见电泳条带清晰完整,表明获得的总RNA质量较好且纯度高.rmiRNA芯片检测结果显示,与正常对照组相比,在高糖组一共筛选出49个差异表达的miRNAs(上调＞2倍或下调＜0.5倍),其中表达上调的miRNAs 31个,表达下调的miRNAs 18个.对miRNA芯片检测结果显示在正常对照组和高糖组间表达有差异的has-miR-320c和has-miR-29a*进行实时荧光定量PCR验证,结果与芯片结果一致；对这两个miRNAs进行靶基因预测,结果显示这两个基因涉及很多生长因子和蛋白.结论 部分miRNA在高糖刺激下的HRCEC中存在差异性表达.
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